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    早期泌尿系感染淋巴细胞亚群改变的临床探究

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    《泌尿外科杂志》2017年第3期

    [摘要]目的:探讨早期泌尿系感染T淋巴细胞亚群改变以帮助临床的早期诊断和治疗。方法:研究纳入2016年3~12月我院收治97例患者以及健康体检者26例,通过对各组外周血白细胞、中段尿白细胞计数、T淋巴细胞亚群计数和尿培养进行统计学差异以及ROC曲线分析,评价T淋巴细胞亚群对诊断早期泌尿系感染的敏感性、特异性。结果:根据外周血白细胞、中段尿白细胞、T淋巴细胞亚群计数以及中段尿细菌培养阳性结果分为4组,淋巴细胞亚群包括CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+比值对于泌尿系感染均有较高的敏感性和特异性,CD4+细胞诊断的敏感性和特异性最高,分别达到90%和80%。结论:T淋巴细胞亚群计数对于早期泌尿系感染的诊断具有明显的优势,从而可以帮助临床预防术后尿源性脓毒症的发生。

    [关键词]T淋巴细胞亚群;泌尿系感染;尿培养

    泌尿系感染又称尿路感染,是发生在肾脏、输尿管、膀胱以及尿道等泌尿系统感染的总称〔1〕,泌尿系感染会发展为不同的阶段,我们把尚未发展为尿源性脓毒症以及全身炎症反应综合征(SIRS)的泌尿系感染定义为早期泌尿系感染。泌尿系梗阻引起的泌尿系感染在泌尿外科临床上是非常常见的,手术前对细菌尿与脓尿的及时发现,能够避免因手术而导致细菌进入血液从而引起尿源性脓毒症的可能。在临床上有一些假阴性脓尿而存在细菌尿的患者,对于这类患者,等待细菌培养的过程往往会耽误病情,我们如何能够及时发现这类患者?国内外的一些动物以及人体试验表明,对于细菌感染,通过淋巴细胞的检查能早期发现改变,为此,本次临床研究通过对患者T淋巴细胞亚群的检查,从而从患者免疫的角度诠释细菌与免疫的关系,希望为临床的早期诊断和治疗带来便利。

    1资料与方法

    1.1临床资料

    研究纳入2016年3~12月我院收治97例患者及26例正常健康体检者,在未使用抗生素以及其他治疗的情况下收集患者血液标本以及中段尿,将其分为4组:第1组为血常规、尿培养阴性,但尿常规中白细胞超过正常值的患者30例;第2组为血常规、尿常规正常,尿培养阳性患者26例;第3组为血常规阴性,尿常规、尿培养阳性患者41例;第4组为血常规、尿常规以及尿培养均为阴性的26例正常健康体检者。排除标准:①年龄<18岁;②艾滋病或恶性肿瘤;③泌尿系完全梗阻导致假阴性的脓尿;④排除其他疾病以及其他器官感染的患者;⑤血常规白细胞增多以及脓毒症的患者。

    1.2检测指标和实验方法

    纳入本研究的对象均在入院时第一时间采集血液样本(8h内新鲜全血K2EDTA抗凝)以及中段尿培养标本,环境要求为室温(20℃~30℃),湿度(35%~65%)。稀释血样:配制磷酸盐缓冲液,反吸法取20μl静脉血或手指末梢血加至380μl磷酸盐缓冲液中,充分混匀。加样孵育:充分混匀,反吸法取5μl稀释血,加至玻片(SEMIBIOCD细胞检测玻片),湿盒内加入室温水,水平放置,孵育40min。洗染计数通过我院病理科的SEMIBIOCyto-Counter系列全自动可视化细胞检测仪定量计数。

    1.3统计学方法

    采用SPSS19.0统计软件。对于符合正态分布的计量资料用􀭺x±s表示,两组间的比较采用t检验;不符合正态分布的资料则采用中位数表示,两组间的比较采用Wilcoxon秩和检验;计数资料采用χ2检验,应用受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标之间的关系。以P<0.05为差异有统计学意义。

    2结果

    2.1一般资料

    各组比较年龄差异无统计学意义。第1组与第3组尿白细胞计数差异无统计学意义。各组血常规白细胞差异无统计学意义,见表1。根据患者泌尿系感染的部位分成上尿路(肾结石和肾盂肾炎)和下尿路(前列腺增生以及膀胱炎),对比发现二者尿白细胞以及T淋巴细胞亚群计数比较差异无统计学意义。

    2.2细菌感染对外周血T淋巴细胞亚群结果的影响

    各组淋巴细胞亚群计数结果及各组间的比较结果见表3,从中看出第1组和第3组、第2组和第4组比较CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+比值差异均有统计学意义(P<0.05);但第1组和第4组比较CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+比值差异均无统计学意义,第2组与第3组比较CD3+、CD4+比值差异均无统计学意义,这足已说明尿培养阳性与淋巴细胞亚群计数有非常明确的关系。

    2.3外周血T淋巴细胞亚群及尿白细胞诊断细菌感染的性能比较

    由图1以及表4,可见淋巴细胞亚群包括CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+比值对于泌尿系感染均有较高的敏感性和特异性,其中CD4+无论敏感性,还是特异性,都达到较理想水平。

    3讨论

    3.1细菌性尿路感染与外周血中淋巴细胞亚群的关系

    T淋巴细胞介导机体的细胞免疫,T淋巴细胞调节蛋白质抗原引起的免疫应答,并能清除细胞表面抗原或细胞内微生物。其免疫功能主要由T淋巴细胞亚群决定,最重要的是辅助细胞(CD4+)和杀伤抑制细胞(CD8+),两者比例失调影响人体免疫系统,从而使免疫力下降并引起感染和肿瘤〔2〕。Mercado等〔3〕和Herrmann等〔4〕通过老鼠实验研究细菌感染对T淋巴细胞亚群的影响时发现CD4+和CD8+细胞在感染的24h内会扩增并达到高峰,如果感染持续存在,其数目会直线下降,并在48h之后低于正常值。Loh等〔5〕通过研究正常人吸入内毒素后淋巴细胞亚群改变的结果发现:吸入内毒素的正常人在6h后CD4+和CD8+细胞会明显降低。所以出现临床症状以及患者尿培养阳性时往往是机体对抗细菌处于弱势时出现的结果,此时的T淋巴细胞亚群往往是减少的。通过本试验可以发现,无论是否出现脓尿,尿培养阳性患者T淋巴细胞亚群数目均明显低于对照组。脓尿是最常见的泌尿系感染性疾病,但汪秀英等〔6〕通过徐州市23741例健康体检者尿白细胞流行现况及危险因素分析发现,有2802例尿白细胞超过正常值的健康人存在,说明白细胞尿广泛见于各种无症状的泌尿系感染性疾病。所以临床上仅仅通过患者白细胞尿来判断感染和利用抗生素可能缺乏证据。

    3.2外周血中淋巴细胞亚群诊断细菌性泌尿系感染的敏感性和特异性

    通过对不同指标的ROC曲线分析可以发现,CD4+细胞诊断的敏感性和特异性最高,分别达到90%和80%。而尿白细胞诊断的敏感性和特异性相对较低,分别为36.7%和42.5%。提示外周血中淋巴细胞亚群能够早期诊断细菌性感染,并可以通过控制感染和增强机体免疫力达到早期治疗,以及帮助手术的效果。

    3.3外周血中淋巴细胞亚群诊断早期泌尿系感染的临床意义与应用

    泌尿系感染是最流行的感染性疾病,给社会造成巨大的经济负?!?〕。在美国,每年有超过700万就诊人群〔7〕,有超过15%的经验用抗生素发生耐药〔8〕,泌尿系结石细菌培养阳性率达到28.23%〔9〕,这使得早期发现以及规范治疗成为我们急需处理的问题。治疗前的中段尿标本培养是泌尿系感染诊断的最可靠指标,但培养时间较长,花费较多。临床上医生往往通过尿沉渣镜检发现尿白细胞来诊断泌尿系感染,从而早期应用抗生素。ZahurZaman等〔10〕通过尿沉渣全自动分析仪和尿干化学检查法结果与尿培养阳性结果做对比,发现上述2种方法并不能很好的预测尿培养结果。高飞等〔11〕通过研究UF-100和干化学筛检尿路感染的临床意义时发现,联合检测细菌计数、白细胞、尿沉渣白细胞(LEU)、亚硝酸盐(NIT)与尿培养结果比较显示尿干化学法和尿沉渣分析仪的结果尚不能作为泌尿系感染的可靠筛选。临床上通过尿常规中白细胞计数的升高来判断泌尿系感染从而早期应用抗生素时往往会导致抗生素耐药的产生。随着CD细胞检测玻片计数的革新,快速检测CD细胞亚群成为可能。淋巴细胞亚群能够反应患者早期免疫功能的改变,通过这种改变来诊断感染具有重要的价值,早在1999年国内就有研究发现T淋巴细胞亚群对泌尿系感染具有诊断价值〔12〕。但因为检测技术的不成熟以及价格的昂贵,没有在临床得到推广。通过本研究发现T淋巴细胞亚群数目的改变相对于尿白细胞能更好的预测尿培养结果,从而能够提高泌尿系感染的早期诊断效能。

    综上所述,细菌等病原体感染是导致机体发生免疫功能障碍的一个重要原因,而病原体如果一直存在,将会导致恶性循环。在对抗病原体的同时,我们尚需通过其他手段来提高患者的免疫功能以达到防止再次感染的可能。随着T淋巴细胞亚群数目检测方法的改进,现实现低成本高效率完成对患者T淋巴细胞亚群的检测,通过本研究可以知道,其诊断细菌感染的敏感性和特异性明显高于血常规以及尿常规,因此对于临床上的作用是值得肯定的。

    作者:李华福1;叶啸1;邱广富1;任达宏2;谢群1

    泌尿外科杂志责任编辑:张雨    阅读:人次
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